《医用生物化学》课程教学大纲及实施意见

责任教师     

2004年9月

 

一、本课程的地位、作用和任务

 

《医用生物化学》是广播电视大学医科类专业的一门重要的专业课程。

生物化学是研究生命化学的科学,它在分子水平上探讨生命的本质,即研究生物体的化学组成及化学变化规律的科学。医用生物化学主要研究人体的生物化学。近年来,生物学、微生物、免疫学、生理学和病理学等基础医学学科的研究均深入到分子水平,并应用生物化学的理论和技术解决各个学科的问题。同样,生物化学与临床医学的关系也很密切。近代医学的发展经常运用生物化学的理论方法来诊断、治疗和预防疾病,而且许多疾病的机理也需要从分子水平上加以探讨。为了深入理解人体的功能和认识某些疾病的本质,必须学习生物化学知识。医用生物化学课程为其它医学基础课程和临床医学课程提供必要的理论基础,是医学各专业的必修课。

通过本课程的学习,使学生理解生物分子的结构与生理功能,以及两者之间的关系;理解生物体重要物质代谢的基本途径、主要生理意义、调节以及代谢异常与疾病的关系;理解基因信息传递的基本过程、基因表达调控的概念;理解各组织器官的代谢特点及它们在医学上的意义。

本课程的教学应以辨证唯物主义观点和科学方法为指导,在教学过程中注意加强学员基本理论、基本机理和实验能力的学习和培养,同时注意理论联系实际、培养学生的全面综合分析问题的能力,以利于大专层次人才的培养。请各分校和教学点在组织本课程的教学中,按照本课程教学大纲及实施意见的教学要求和教学内容执行。

该课程是在有机化学、人体解剖学基础上开设。

    本课程的课内学时90,电视课学时26,实验课学时27(本课程必做实验4~5个),5学分。

本课程教材选用由周爱儒、黄如彬主编的《医学生物化学》,北京大学医学出版社出版,20048月第2版。

 

二、学时分配

 

 

 

   

  第1 章

蛋白质化学

6

2 章

核酸化学

5

3 章

5

4 章

维生素

2

5章

糖代谢

8

6章

脂类代谢

8

7 章

生物氧化

4

8 章

氨基酸代谢

8

9 章

核苷酸代谢

4

10章

物质代谢的联系与调节

4

11章

DNA的生物合成—复制

4

12章

RNA的生物合成—转录

4

13章

蛋白质的生物合成—翻译

5

14章

基因表达调控与基因工程

4

15章

肝胆生化

5

16章

血液生化

4

17章

骨骼与钙磷代谢

4

18章

水、电解质和酸碱平衡

3

19章

分子生物学常用技术的原理与应用

2

20 章

基因组与医学

2

 

三、教学要求和教学内容

 

第一章   蛋白质化学

教学要求

    1、掌握蛋白质的化学组成:元素组成特点;基本结构单位α-氨基酸,组成蛋白质常见氨基酸的基本结构。掌握蛋白质结构与功能的关系;一级结构与功能的关系;空间结构与功能的关系。

2、 熟悉蛋白质的重要理化性质:两性解离及等电点;高分子性质;变性沉淀等概念及其医学的关系。

3、了解蛋白质是生命活动物质基础的含义,掌握蛋白质的重要生理功能。

教学内容

§1-1  蛋白质的分子组成

一、蛋白质的基本结构单位——氨基酸

二、氨基酸在蛋白质分子中的连接方式

三、蛋白质的分类

§1-2   蛋白质的分子结构

一、蛋白质的一级结构

二、蛋白质的二级结构

三、蛋白质的三级结构

四、蛋白质的四级结构

§1-3蛋白质分子结构与功能的关系

一、蛋白质一级结构与功能的关系

二、蛋白质分子构象与功能的关系

§1-4蛋白质的理化性质

一、蛋白质的两性电离  

二、蛋白质的胶体性质

三、蛋白质的沉淀

四、蛋白质的变性

五、蛋白质的吸收光谱几种重要呈色反应

 

第二章    核酸化学

教学要求 

1、掌握两类核酸(DNA与RNA) 分子组成的异同。

2、掌握多核苷酸链中单核苷酸之间的连接方式——磷酸二酯健,并通过 这种连接方式理解多核苷酸链的方向性。

3、熟悉核酸的分类 细胞分布及其生物学功能。

4、熟悉核酸的元素组成、分子组成;核苷酸 、核苷和碱基的基本概念及其结构;熟记常见核苷酸的缩写符合;熟悉体内重要的环化核苷酸——cAMP和cGMP。

5、熟悉核酸的理化性质:核酸的紫外吸收性质,核酸 特别是DNA变性 复性及杂交等概念 。

教学内容 

§2-1  核酸的一般概述

一、核酸的发现与发展简史

二、核酸在体内的分布与含量

§2-2  核酸的化学组成

一、戊糖

二、含氮碱

三、核苷

四、核苷酸

五、体内重要的游离核苷酸及其衍生物

§2-3  DNA的分子结构

一、DNA的一级结构

二、DNA的空间结构

§2-4 RNA的分子结构

一、核蛋白体RNA

二、转运RNA

三、信使RNA

    §2-5  核酸的理化性质及应用

一、核酸的酸碱性质

二、核酸的高分子性质

三、核酸的紫外吸收

四、核酸的变性 复性与杂交

 

第三章    

教学要求

1、掌握酶的化学本质;酶的特异性(专一性)。了解酶促反应的机理:活化能 中间产物学 说的概念。酶在医学中的应用和酶的命名及分类。

2、掌握酶的化学组成。结合蛋白酶(全酶)的酶蛋白与辅助因子(辅酶与辅基)之间的关系; 酶的活性中心和必需基因。酶原的激活;同工酶和变构酶。

3、 掌握酶促反应动力学的基本内容:温度 pH 酶浓度 作用物浓度 竞争性抑制 非竞 性抑制物及激动剂对酶促反应速度的影响。米氏方程 米氏常数意义。三种抑制作用对最大速度和Km的影响。

4、掌握酶活性测定的基本原则,酶活性单位的概念。

5、了解酶促反应的机理:活化能;中间产物学说的概念。

6、了解酶在医学中的应用和酶的命名及分类。

教学内容 

§3-1   酶的一般概念

一、极高催化效率

二、高度专一性(特异性)

三、酶活性可调性

四、高度不稳定性

§3-2   酶的结构与功能

一、酶的化学组成

二、酶的活性中心

三、酶原和酶原的激活

四、同工酶

五、别构酶(变构酶)

§3-3 酶的作用机理

一、酶-作用物复合物的形成和诱导契合学说

二、趋近效应与定向作用

三、酸-碱催化作用

四、表面效应

§3-4   酶促反应动力学

一、底物浓度的影响

二、酶浓度的影响

三、pH的影响

四、温度的影响

五、激活剂的影响

六、抑制剂的影响

§3-5   酶的分类和命名

  一、酶的分类

  二、酶的命名

§3-6   酶与医学的关系

一、酶与疾病的关系

二、酶与疾病的诊断

三、酶与疾病的治疗

 

第四章             维生素

教学要求

  1、掌握B族维生素与辅酶的关系。

2、熟悉维生素的概念及其在营养上的重要性。熟悉脂溶性维生素A、 D 、E、K及水溶性维生素的主要来源、化学结构特点及参与物质代谢的主要作用。

3、了解维生素分类及其缺乏症。

教学内容

§4-1    脂溶性维生素

一、维生素A

二、维生素D

三、维生素E

四、维生素K

§4-2      水溶性维生素

一、B族维生素

二、维生素C

三、硫辛酸

第五章             糖代谢

教学要求

1、掌握维持人体血糖浓度的相对恒定的各种途径(来源与去路)组织器官(肝脏、肌肉)和激 素对血糖的调节作用。

2、掌握糖酵解的基本反应过程。

3、掌握糖有氧氧化的基本反应过程限速酶 ATP的生成、生理意义及调节。

4、掌握糖有原合成与分解的基本反应过程,掌握其生理意义及调节。

5、掌握糖原累积症的预防与治疗。

6、熟悉糖异生的概念与基本反应过程,掌握糖异生途径的限速酶、生理意义与调节。

7、了解糖的重要生理功能及在人体内的消化与吸收。

8、了解磷酸戊糖途径的基本过程及其生理意义。

教学内容

§5-1    概述

一、糖的生理功用

二、糖的消化吸收

§5-2    糖的分解代谢

一、糖的无氧分解

二、糖的有氧氧化

三、磷酸戊糖途径

§5-3    糖原的合成与分解

一、糖原的合成代谢

二、糖原的分解代谢

三、糖原合成与分解的调节

四、糖原累积症

§5-4    糖异生  

一、糖异生途径

二、糖异生的调节

三、糖异生的生理意义

§5-5    血糖及其调节

一、血糖来源与去路

二、血糖水平的调节

三、血糖水平异常

 §5-6    糖蛋白与蛋白聚糖

  一、糖蛋白

  二、蛋白聚糖

 

第五章    脂类代谢

教学要求

1、掌握甘油三脂水解的关键酶,脂肪酸活化、转运和β-氧化过程,酮体生成、氧化和生理意义及酮症。

2、熟悉血脂的种类和含量。血浆脂类的方法与组成;载脂蛋白,各类脂蛋白的生理功能。

3、熟悉甘油代谢。

4、熟悉磷脂酰胆胺和磷脂酰胆碱合成。

5、熟悉胆固醇的合成部位、转化及排泄。

6、了解人体内脂类生理功能;消化与吸收。

7、了解脂蛋白的代谢与高脂蛋白血症。

8、了解甘油三酯的水解。了解脂肪酸合成的基本过程及合成的最终产物。

9、了解合成甘油三脂的基本途径和甘油三脂的代谢调节。

10、了解其它甘油磷脂的合成。

教学内容

§6-1   脂类的分布与生理作用

一、脂肪的分布

二、脂类的生理作用

§6-2   脂类的消化和吸收

一、消化

二、 吸收

§6-3    血浆脂蛋白代谢

一、 血脂

二、 血浆脂蛋白

三、血浆脂蛋白的代谢

四、高血脂症

§6-4   甘油三酯的中间代谢

一、脂肪动员

二、脂肪酸的β-氧化

三、 酮体的生成和氧化

四、脂肪酸的合成

五、甘油的代谢

六、甘油三脂的合成

§6-5    磷脂代谢

一、甘油磷脂的组成与结构

二、甘油磷脂的合成

三、甘油磷脂的分解  

§6-6    胆固醇的代谢

一、胆固醇在体内的分布及生理功用

二、胆固醇的合成

三、胆固醇的酯化

四、胆固醇在体内的转变与排泄

 

第七章   生物氧化

教学要求 

1、掌握氧化磷酸化作用的概念、偶联部位及影响因素。2、熟悉呼吸链的主要组成成份以及电子传递顺序。

2、熟悉ATP的生理功用。

3、了解线粒体外NADH转运进入线粒体的机 制。

4、了解生物氧化的概念及有关酶类。

5、了解氧化磷酸化的机制。

6、了解线粒体外生物氧化体系的主要场所,酶体系的作用和意义。

教学内容 

§7-1   生物氧化概述

一、概述

二、生物氧化的特点

三、生物氧化反应的类型

四、生物氧化反应的酶类

五、生物氧化过程中CO2的生成

§7-2   线粒体氧化体系

一、呼吸链的组成及电子传递顺序

二、生物氧化过程中ATP的生成  

三、线粒体外NADH的转运

四、ATP的生理功用

§7-3   非线粒体氧化体系

一、微粒体氧化体系

二、过氧化物酶体氧化体系

 

第八章   氨基酸代谢

教学要求

1、掌握体内氨基酸代谢概况;氨基酸的脱氨基作用——转氨基作用及转氨酶。

2、掌握氨代谢——体内氨的来源,转运和去路。尿素合成的主要部位,主要过程,限速酶 。氨中毒。谷氨酰胺的生成与分解。

3、熟悉α-酮酸的代谢。

4、熟悉氨基酸的脱羧基作用;具有生理活性的胺和多胺。

5、了解氨基酸的主要生理功能;蛋白质的消化,吸收与腐败作用。

6、 了解个别氨基酸代谢:熟悉一碳单位的概念、来源、转变、功能。四氢叶酸与一碳单位代谢的关系。蛋氨酸与转甲基作用。活性硫酸根。苯丙氨酸、酪氨酸代谢与儿茶酚胺、黑色素及甲状腺素的生成。了解个别氨基酸代谢异常引起的遗传性疾病。

教学内容

§8-1  蛋白质的营养作用

一、蛋白质的生理功用

二、蛋白质的需要量

三、蛋白质的营养价值

§8-2   蛋白质的消化、吸收与腐败  

一、蛋白质的消化

二、氨基酸的吸收  

三、蛋白质的腐败作用

§8-3   氨基酸的一般代谢

一、体内氨基酸的代谢概况

二、氨基酸的脱氨基作用

三、α-酮酸的代谢

四、氨的代谢

五、氨基酸的脱羧基作用

§8-4  个别氨基酸的代谢

一、一碳单位的代谢

二、含硫氨基酸的代谢

三、芳香族氨基酸代谢

 

第九章    核苷酸代谢 

教学要求

1、掌握嘌呤核苷酸的从头合成:原料、基本途径、反馈调节。了解嘌呤核苷酸的补救合成 。

2、掌握嘧啶核苷酸的从头合成:原料、基本途径、反馈调节。脱氧核苷酸的生成。

3、熟悉核苷酸的抗代谢物:嘌呤、嘧啶类似物、叶酸类似物、氨基酸类似物。

4、熟悉核苷酸的分解代谢:嘌呤核苷酸分解与尿酸的生成,高尿酸血症

5、了解核苷酸的重要生理功能。

6、了解核酸的消化与吸收。

教学内容

§9-1    核苷酸的合成代谢

一、嘌呤核苷酸的合成

二、嘧啶核苷酸的合成

三、核苷酸的抗代谢物及临床应用

§9-2    核苷酸的分解代谢

一、嘌呤核苷酸的分解代谢

二、嘧啶核苷酸的分解代谢

 

第十章    物质代谢的联系与调节

教学要求

1、掌握物质代谢的相互联系及特点。

2、掌握变构酶的概念及其生理意义。酶蛋白化学修饰的概念及其生理意义。

3、熟悉重要物质代谢途径的亚细胞定位。熟悉限速酶的概念。

4、熟悉激素与受体作用的特点。作用于细胞膜受体的激素调节机理—— 特点 cAMP的形成及第二信使理论,Ca与钙调节蛋白。作用特点及基本过程。

5、熟悉整体的物质代谢调节。

6、了解物质代谢调节的意义及方式。

7、了解酶的隔离分布。了解酶含量的调节——酶合成的诱导与阻遏。

教学内容

§10-1    概述

§10-2    物质代谢的相互联系

§10-3    物质代谢的调节

一、 酶结构的调节

二、激素(内分泌)水平的调节

三、整体水平的调节

 

第十一章     DNA的生物合成——复制

 教学要求

1、掌握遗传信息传递的中心法则及其补充。

2、掌握DNAR复制的方式——半保留复制。复制的原料 模板 参与复制的酶类和因子。

3、熟悉DNA复制的基本过程。

4、了解DNA的损伤与修复的概念。

5、了解逆转录过程。

教学内容

§11-1   染色体DNA的复制

一、染色体DNA复制的方式

二、参与复制的酶类

三、DNA复制的过程

四、 DNA复制与细胞周期

§11-2   DNA的损伤与修复

§11-3   逆转录过程

 

第十二章    RNA的生物合成——转录

教学要求 

1、掌握转录的原料、模板、酶及转录的基本过程。

2、熟悉转录后RNA加工的几种方式:mRNA tRNA及rRNA的加工。

教学内容

§12-1   RNA转录体系

一、DNA模板

二、DNA指导的RNA聚合酶

§12-2   RNA转录的基本过程

一、起始阶段

二、链的延长

三、链的终止

§12-3   RNA转录后的加工过程

一、信使RNA(mRNA)的加工

二、转运RNA(tRNA)的加工

三、核蛋白体RNA(rRNA)的加工

 

第十三章    蛋白质的生物合成——翻译 

教学要求 

1、掌握蛋白质生物合成的概况:原料、三类RNA在蛋白质生物合成中的作用、遗传密码的概念及其特点。

2、熟悉蛋白质合成的基本过程:氨基酸的活化与转运;肽链的起始、延长及终止。核蛋白体循环。

3、熟悉翻译后加工过程的方式。

4、了解蛋白质合成与医学的关系:分子病。抗生素对蛋白质合成的影响。

教学内容

§13-1   蛋白质生物合成体系

一、 mRNA与遗传密码

二、氨基酸的搬运工具”—tRNA

三、肽链合成的装配机”—核蛋白体

§13-2   蛋白质生物合成过程

一、氨基酸的活化与转运

二、肽链合成的起始

三、肽链的延长

四、肽链的终止

五、蛋白质空间构象折叠与其它翻译后的加工

§13-3   蛋白质合成与医学

一、分子病

二、抗生素对蛋白质合成的影响机理

 

第十四章     基因表达调控与基因工程

教学要求

1、掌握基因表达的概念 规律 方式及调节的意义。

2、掌握基因工程基本概念、主要过程。

3、结合操纵子理论, 熟悉原核基因调控基本原则。

4、了解基因表达调节的要素,如DNA元件 调节蛋白及调节蛋白——DNA相互作用。

5、了解真核基因调控基本原则。

教学内容

§14-1     基因表达调控

一、基因表达的概念及基因表达调控的意义

二、基因表达调节的规律与方式

三、基因表达的多级水平调控

四、 转录起始调节方式中基因表达调控的要素及其相互作用

§14-2  原核基因表达调控与真核基因表达调节基本原理

  一、原核基因表达调控的特点及基本原理

  二、操纵子理论

  三、真核基因表达调控

§14-3    基因工程

一、基因工程相关的概念

二、基因工程基本原理

三、基因工程与医学

第十五章      肝胆生化

教学要求 

1、掌握肝脏在糖、脂类、蛋白质、维生素和激素代谢中的作用。

2、掌握生物转化作用的定义,反应类型,尤其是加单氧酶和结合反应。

3、熟悉影响生物转化 作用的因素。

4、熟悉胆汁酸的来源 种类 排泄和肠肝循环及其生理功能。

5、在掌握胆红素正常代谢的基础上,能较熟练地对三种黄疸的病因及血、尿、便检查进行分析、比较。

6、了解肝脏功能受损时物质代谢紊乱的表现。

7、了解常见的几种肝功能检查的生化基础及临床意义。

教学内容

§15-1    肝脏在物质代谢中的作用

一、肝脏在糖代谢中的作用

二、肝脏在脂类代谢中的作用

三、肝脏在蛋白质代谢中的作用

四、肝脏在维生素代谢中的作用

五、肝脏在激素代谢中的作用

§15-2   肝脏的生物转化作用

一、肝脏中非营养性物质的来源

二、生物转化作用概述

三、影响生物转化类型及酶系

四、影响生物转化的因素

§15-3   胆汁酸代谢

一、胆汁酸化学

二、胆汁酸的代谢

三、胆汁酸的生理功能

§15-4   胆色素的代谢与黄疸

一、胆红素的来源与生成

二、胆红素在血中的运输

三、胆红素在肝内的转变

四、胆红素在肠中的转变

五、血清胆红素与黄疸

§15-5   常用的肝功能检验

一、血清中酶的测定

二、肝炎免疫测定及肿瘤标志物测定

三、肝脏生物转化和排泄功能

 

第十六章     血液生化

教学要求

1、掌握血液非蛋白质含氮物质的种类及临床意义。

2、掌握血浆蛋白质的组成、分类及主要功能。

3、熟悉血液的化学组成及生理功能。

4、熟悉成熟红细胞的代谢特点,血红素生物合成的基本过程及调节。

5、了解血红蛋白的结构和功能,铁的代谢。

教学内容

§16-1    血液的化学成份

  一、蛋白质

  二、非蛋白质含氮物

  三、不含氮的有机物

  四、无机盐

§16-2    血浆蛋白质

一、血浆蛋白质的组成

二、血浆蛋白质的功能

§16-3    红细胞代谢

一、成熟红细胞的代谢特点

二、血红蛋白

§16-4    白细胞代谢

一、糖代谢

二、脂代谢

三、氨基酸和蛋白质代谢

 

第十七章     骨骼与钙磷代谢

教学要求

1、掌握钙磷的生理功能,影响血钙和血磷浓度的因素,维生素D的代谢及活性维生素D、甲状旁腺素和降钙素对钙、磷代谢的调节。

2、熟悉血液中钙磷的存在形式,骨的组成、骨的生成及溶解,血清碱性磷酸酶测定的临床意义。

3、了解钙磷的吸收与排泄,以及钙磷代谢的紊乱。

教学内容

§17-1    体内钙磷的含量、分布及生理功能

一、钙磷的含量及分布

二、钙磷的生理功能

§17-2    钙磷的吸收与排泄

一、钙的吸收与排泄

二、磷的吸收与排泄

§17-3    血钙与血磷

一、血钙

二、血磷

§17-4   骨的代谢

一、骨的组成

二、成骨作用

三、溶骨作用

§17-5   钙磷代谢的调节

一、1,25-二羟维生素D3[1,25-(OH)2-D3]

二、甲状旁腺素(PTH)

三、降钙素(CT)

§17-6   钙磷代谢紊乱

一、佝偻病及骨软化症

二、抗维生素D佝偻病

三、骨质疏松症

 

第十八章    水、电质和酸碱平衡

教学要求

1、掌握人体水与电解质分布、含量、电解质组成;钾离子的代谢特点;抗利尿激素和醛固酮对水盐代谢的调节机理。

2、掌握酸碱平衡的概念;血浆中主要缓冲对的作用和意义;肺与肾脏在调节酸碱平衡中的作用及意义。

3、掌握血液pH,二氧化碳结合量,碱贮含量及意义;肾脏对Na保留的几种方式。

4、熟悉Na 、Cl的代谢特点,酸碱平衡紊乱代偿机制。

教学内容

§18-1    水与电解质的代谢

一、水的生理功能

二、水的平衡

三、无机盐的生理功用

四、无机盐的平衡

§18-2    正常人的体液  

一、体液的含量与分布

二、体液中的电解质  

三、各部分体液的交换

§18-3    水和无机盐平衡的调节

一、神经系统的调节

二、肾脏的调节

三、激素的调节

四、脱水与水肿

§18-4    酸碱平衡

一、体内酸碱物质的来源

二、酸碱平衡的调节

§18-5    酸碱平衡紊乱

一、代谢性酸中毒

二、呼吸性酸中毒

三、代谢性碱中毒

四、呼吸性碱中毒

 

第十九章    分子生物学常用技术的原理与应用

教学要求

1、掌握PCR技术基本反应天下的组成、PCR反应基本步骤与PCR反应的运用。

2、掌握印迹技术基本原理与三种印迹技术的应用范围。

3、熟悉双脱氧法DNA测序的基本原理与蛋白质氨基酸测序的基本步骤。

4、了解转基因、核转移与基因剔除技术的含义与应用范围。

教学内容

§19-1    PCR技术

一、PCR的工作原理

PCR的技术应用

§19-2    核酸序列分析

一、化学裂解法

二、 双脱氧法

§19-3    蛋白质多肽链序列分析

§19 -4    印迹技术

一、印迹技术的原理

二、印迹技术的类别及应用

§19-5    转基因与基因剔除技术

一、转基因技术

二、核转移技术(克隆)

三、基因剔除技术

四、基因转移和基因剔除技术在医学中的应用

 

第二十章  基因组与医学

教学要求

1、掌握基因组研究的基本内容。

2、通过肿瘤细胞相关基因与艾滋病HIV病毒基因熟悉内源性基因突变与外源性基因引入对人类健康影响的分子机制。

3、熟悉以基因增补为目的的基因治疗基本程序。

4、了解基因组学与人类基因组研究计划的关系。

5、了解基因诊断的概念、特点与几种基因诊断检测的策略。

教学内容

§20-1   基因组与后基因组概述

一、人类结构基因组学

二、人类功能基因组学

三、生物物种间比较基因组学

      §20-2   肿瘤细胞相关性基因与艾滋病HIV病毒基因

一、癌基因、抑癌基因与肿瘤细胞无限增殖

二、艾滋病HIV病毒基因与艾滋病

     §20-3   基因诊断

一、基因诊断的基本概念

二、基因诊断的几种实验策略

     §20-4   基因治疗

一、基因治疗的基本概念

二、基因治疗的基本程序

三、基因治疗的应用程序与展望

 

四、实验

1、蛋白质定量测定

2、核酸定量测定

3、影响酶促反应的因素

4、血粒测定

5、血浆脂蛋白/胆固醇测定

6、血清转氨酶测定

7、血清蛋白电泳

8、尿素氮的测定

9、琥珀酸脱氢酶活性的测定(定性)

各分校和教学点在组织本课程的教学中尽可能地多安排实验,必做实验45个。